结核实验诊断方法众多，如何选择？

结核病是由结核分枝杆菌复合群（Mycobacterium tuberculosis complex，MTBC）引发的一种慢性传染病，根据感染部位不同分为肺结核（占比超过80%）和肺外结核。我国是结核病高负担国，根据世界卫生组织2023年11月7日发布的《2023年全球结核病报告》，我国2022年估算的结核病新发患者数为74.8万（2021年78.0万），估算结核病发病率为52/10万（2021年55/10万）。在30个结核病高负担国家中我国估算结核病发病数排第3位，占全球发病数的7.1%。我国的结核病死亡数估算为3万，结核病死亡率为2.0/10万。估算耐多药/利福平耐药结核病（MDR/RR-TB）患者为3万。

内江市第二人民医院是内江市传染病防治中心，是内江市结核病市级定点医院，检验科（医学转化科）已建立了完整的结核实验室诊断平台和高素质的专业医疗技术团队，也是内江市唯一开展了病理组织结核杆菌核酸检测的医院。而目前，已开展的关于结核病诊断相关的实验室检查在内江地区也是最全面的，包括病原学诊断方法、免疫学诊断试验和分子生物学方法，具体有：

1.结核涂片检查

用显微镜观察涂片中是否有分枝杆菌，无论是活菌或死菌、结核分枝杆菌或非结核分枝杆菌均可以被检测到。

图1：分枝杆菌显微镜下形态（抗酸染色×1000）

特点：操作简便、快捷、人员技术要求不高、价格低廉；但灵敏度低（每毫升痰标本中含至少 5000-10000 条抗酸菌才能被检测到），且无法区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌。

图1

2.结核菌培养

分离培养检查检测标本中存活的分枝杆菌，我院采用的是固体分离培养法。培养法是结核病原学诊断的金标准。

图2：结核分枝杆菌在罗氏培养管上培养30天的菌落形态

特点：实验室环境要求高、特异性高、检出率中等（每毫升痰标本中至少含 10-100 条结核分枝杆菌即可被检测到）、耗时长（6-8周）、诊断金标准之一。

图2

3.结核抗体检测

检测MTBC感染机体后刺激免疫系统产生的特异性抗体。

特点：采样方便、操作简单、灵敏度低、特异度不高，不能区分隐形感染和发病病人。

4.结核感染T细胞γ干扰素释放试验（interferon-γ release assays，IGRA）

近年用于结核病辅助诊断的新型免疫学方法，通过MTBC特异抗原刺激T淋巴细胞释放γ干扰素来检测是否存在结核感染。

特点：设备要求高、操作复杂、标本要求高、可避免疫苗接种带来的干扰，但不能区分活动性结核和非活动性结核，在无病原学依据时，作为结核诊断的补充。

5.结核杆菌DNA检测

检测标本中是否有结核分枝杆菌核酸目标片段的存在，在排除核酸污染的情况下可确定该检测标本中存在结核分枝杆菌。

特点：特异性高、耗时较短、人员技术要求高、不能检测耐药基因。

6.结核菌菌种鉴定及耐药基因检测（GeneXpert MTB/RIF）

通过检测标本中结核分枝杆菌的特有基因片段，判断是否有结核分枝杆菌以及是否有利福平耐药基因。

特点：操作简便、重复性好、特异性高、阳性率高、可同时检测耐药基因。

7.分枝杆菌菌种鉴定基因检测

分枝杆菌种类繁多，除结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌外，其它的分枝杆菌统称为非结核分枝杆菌。结核涂片阳性或分离培养阳性菌株需进一步进行菌种鉴定及基因分型。

特点：可以区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的种类，实验室环境要求高、特异性高、人员技术要求高，无法确定耐药性。

8.结核分枝杆菌药敏试验（特指表型药敏试验）

结核分枝杆菌药物敏感性试验用于检测分离培养阳性且鉴定为结核分枝杆菌复合群的菌株对各种抗结核药物的敏感性，用于指导制定适宜的结核病治疗方案。

特点：属于经典药敏试验，药物测试数量更多，指导临床用药证据较充分，但实验室环境要求高、人员技术要求高、耗时长。

在《“健康中国 2030”规划纲要》中提到结核病的防治目标，即“建立结核病防治综合服务模式，加强耐多药肺结核筛查和监测，规范肺结核诊疗管理，全国肺结核疫情持续下降“。结核病实验室检查是结核病诊断的重要依据。疑似结核病患者，请及时就诊，并听从医生建议选择合适的实验室检查项目。以达到早发现、早诊断、早治疗的目的。

如果对结核的实验室检查有疑问，欢迎致电内江市第二人民医院检验科：微生物室0832-2381395；免疫室0832-2380579；分子生物室0832-2381502。

附表：结核实验室诊断项目列表

痰标本留取示意图

供稿

检验科 张淑霞